Histomorfometria e índice proliferativo (Ki-67) no carcinoma escamocelular in situ de pregas vocais / Histomorphometry and proliferative index in squamous cell carcinoma in situ of the vocal cords

INTRODUÇÃO: As displasias da laringe são precursoras do carcinoma escamocelular invasivo e constituem lesões pouco comuns, pois a maior parte dos casos é detectada como carcinoma invasor. OBJETIVO: Caracterizar as displasias acentuadas/carcinoma in situ da prega vocal quanto a área do epitélio, diâmetro dos núcleos e índice proliferativo, comparando esses dados com os obtidos no epitélio escamoso normal e de transição. MATERIAL E MÉTODO: Entre as 1.400 biópsias e peças cirúrgicas de lesões intraepiteliais e carcinomas invasivos de laringe (1994-2006), foram selecionados cinco casos (0,35%) pareados com dois controles de epitélio normal e com a idade; todos foram submetidos a análise morfométrica e imuno--histoquímica (Ki-67). RESULTADOS: Comparando-se o epitélio displásico com o normal e de transição observou-se maior área e diâmetro nuclear no epitélio displásico; não houve diferenças significativas no diâmetro dos núcleos por camada entre o epitélio displásico e de transição; e o índice proliferativo foi maior no epitélio displásico com núcleos corados em todas camadas e menor com núcleos limitados a camada basal e parabasal no epitélio normal e de transição. CONCLUSÃO: verifica-se maior área no epitélio displásico. O diâmetro dos núcleos do epitélio displásico e do de transição são semelhantes, mas este apresenta núcleos uniformes em toda extensão em contraste com o pleomorfismo do epitélio displásico. O índice proliferativo (Ki-67) contribui para o diagnóstico diferencial das lesões escamosas da prega vocal, pois no carcinoma in situ/displasia acentuada observa-se maior número de núcleos marcados, os quais são vistos em todas as camadas no epitélio.

INTRODUCTION: Laryngeal dysplasias, precursors of squamous cell carcinomas, are uncommon lesions, inasmuch as most cases are diagnosed as invasive carcinomas. OBJECTIVE: To characterize severe dysplasia/in situ carcinoma of the vocal cords by comparing the area of involved epithelium, nuclear diameter, and proliferative index with transition and normal squamous epithelia. MATERIAL AND METHOD: Among 1,400 surgical and biopsy specimens of laryngeal lesions (1994-2006), five cases (0.35%) were selected and compared according to age with two controls with normal epithelium. Furthermore, all of them were identified and submitted to morphometric and immunohistochemical analysis (Ki-67). RESULTS: After comparing dysplastic with transition and normal squamous epithelia, it was observed an increased nuclear diameter in dysplastic epithelium. Additionally, there was no significant difference in nuclear diameter per layer between dysplastic and transition epithelia. Moreover, the proliferative index was higher in dysplastic epithelium with stained nuclei in all layers and lower in normal and transition epithelia with nuclei concentrated on the basal and parabasal layers. CONCLUSION: Dysplastic epithelium occupies larger areas. Nuclear diameter is similar in dysplastic and transition epithelia. However, the latter has uniform nuclei, in contrast with pleomorphism in dysplastic epithelium. The proliferative index (Ki-67) contributes to the differential diagnosis of intraepithelial lesions of the vocal cords, inasmuch as in severe dysplasia/in situ carcinoma there is a higher number of stained nuclei, which are seen in all epithelial layers.

Perfil imunoistoquímico das proteínas p53 e Ki67 em pacientes com retocolite ulcerativa inespecífica / Imunohistochemical profile of p53 and Ki67 from patients with unspecific ulcerative colitis

Objetivos: O presente estudo avaliou, através da imunohistoquímica e estudo histopatológico, as principais alterações na mucosa intestinal de pacientes acometidos pela retocolite ulcerativa crônica idiopática (RCUI) apenas tratada clinicamente (n=30) ou subseqüentemente tratada com Proctocolectomia total e construção de bolsa ileal (n=30). Métodos: Desta forma, foram selecionados fragmentos de tecido intestinal submetidos à imunomarcação para as proteínas p53 e Ki67 e coloração por hematoxilina-eosina para análise histopatológica comparativa. Resultados: Os resultados obtidos indicam importantes diferenças no perfil inflamatório e presença de áreas de erosão/desgate da mucosa colônica de ambos os grupos estudados. Quanto a imunoexpressão, observou-se uma maior reatividade de padrão nuclear principalmente nos tecidos inflamados dos pacientes com RCUI tratados clinicamente. Conclusões: Estes resultados sugerem que, de acordo com o perfil histopatológico e imunohistoquímico, a mucosa colônica de pacientes submetidos ao tratamento cirúrgico apresenta menos alterações que os pacientes tratados clinicamente. Assim, os dados sugerem que estes métodos podem auxiliar no diagnóstico e monitoramento de pacientes sob diferentes rotinas terapêuticas.

Objectives: The present study evaluated, trough immunohistochemistry and histopatologic analysis, the main alterations in intestinal mucous from patients with unspecific ulcerative colitis (IUC) clinically (n=30) or surgically treated (n=30) with ileal J-pouch and permanent ileostomy. Methods: Thus, tissue slices from intestinal mucous were submitted to imunostains for p53 and Ki67 proteins, and Haematoxilin-eosin staining for comparative histopathological evaluation. Results: The results indicated important differences in inflammatory profile and erosion/necrosis sites on the both investigated groups. Related to imunoexpression was observed a higher reactivity with nuclear pattern, mainly in inflammatory tissues from IUC patients clinically treated. Conclusions: Those results showed that, according to histopathological and imunohistochemical parameters, the colonic mucous from IUC patients submitted to surgical treatment exhibited less alterations than IUC patients clinically treated. The data suggest that those methods could be helpful to diagnosis and assist the accompaniment of patients under different therapeutic routines.

Análise histológica e histoquímica de fatores prognósticos em pacientes com retocolite ulcerativa / Histological and histochemical analysis of prognostic factors in patients with ulcerative colitis

OBJETIVO: Visando oferecer um método que auxilie o diagnóstico diferencial ou mesmo que seja indicador da transformação neoplásica, a galectina-3 surge como um potencial marcador da fisiopatologia de diversos tipos de câncer, entre eles o câncer colorretal. MÉTODOS: o perfil imuno-histoquímico foi obtido do tecido intestinal de pacientes com retocolite ulcerativa (n=20) e sua respectiva contraparte normal, de ambos os sexos e idade média de 55 anos. Os tecidos foram submetidos à histoquímica da reação de Schiff (PAS) para visualizações das inclusões de glicosaminoglicanos e tricrômico de Masson para visualização das fibras colágenas. Fragmentos de tecido (4 µm) foram submetidos à técnica de imuno-histoquímica para a proteína galectina-3. A marcação tecidual foi analisada através de uma estação de trabalho, contendo um microscópio óptico equipado com uma câmera digital, ambos acoplados a um computador contendo o software OPTIMAS®. RESULTADOS: Os resultados demonstram uma diminuição da expressão da galectina-3 no sitio inflamatório da retocolite ulcerativa. Houve um aumento significativo (p<0.022) no número de células caliciformes dos pacientes tratados clinicamente, porém com redução do conteúdo glandular. CONCLUSÕES: Os dados sugerem que a atividade glandular juntamente com a redução da expressão da galectina-3 possam auxiliar o diagnóstico e o monitoramento desses pacientes.

OBJECTIVES: Aiming to offer a diagnosis method or a prognostic marker, galectin-3 appears as a potential marker of the physiopathology of diverse diseases and some types of cancer, between them the colorectal cancer. METHODS: In our study, the immunohistochemical and histological profiles had been taken from intestinal biopsies of patients with ulcerative colitis (n=20) and its respective normal counterpart, from both males and females and average age of 55 years-old. The biopsies had been submitted to Periodic Acid of Schiff (PAS) for visualization of glycosaminoglycans inclusions, and Masson's tricromic for visualization of collagen fibers. Fragments (4µm) had been submitted to the technique of immunohistochemistry for galectin-3 protein. The profiles of tecidual coloration had been analyzed through a work station contend an optic microscope copulated with a digital camera, both connected a computer contend software OPTIMAS®. RESULTS: Our results demonstrate a reduction of galectin-3 expression in ulcerative colitis inflammatory site from surgically and clinically treated patients. The goblet cells number from the surgically treated patients had suffered a significant reduction (p<0.022), however with increase of its glandular content. CONCLUSIONS: The data suggest that the glandular activity together with the reduction of the galectin-3 expression can assist the accompaniment of these patients.

Avaliação histomorfométrica de micronúcleos e colágeno como métodos adicionais no diagnóstico diferencial de neoplasias cutâneas / Histomorphometrical evaluation of the micronucleous and collagen how additional methods in skin neoplasms diagnosis

Este estudo avaliou a densidade de micronúcleos e a distribuição do colágeno intersticial em tumores benignos e malignos de pele. Foram selecionados casos de ceratose seborréica, ceratose actínica, ceratoacantoma e carcinoma basocelular. Os resultados demonstraram um aumento significante do número de micronúcleos nas lesões de carcinoma basocelular e ceratoacantoma. Por outro lado, houve uma redução da área média de colágeno intersticial nas lesões dos mesmos, em relação ao tecido normal. Conclui-se então, que este tipo de análise poderá ser utilizado como parâmetro complementar na diferenciação de lesões cutâneas difíceis de serem diagnosticadas apenas pelos métodos convencionais de análise histopatológica.

This study established the density of micronuclei and distribution of the interstitial collagen in benign andmalign skin tumors. Skin samples from basal cell carcinoma, keratoacanthoma, seborreic keratosis and actinic keratosis were used. The results showed a significant variation in the micronucleus number in the basal cell carcinoma and keratoacanthoma. On the other hand, the mean area of collagen was lower in these ones in relation to the normal tissue. It was concluded that this analysis can be used as complementar parameter in the differentiation of cutaneous lesions with hard diagnosis carried out by means of conventional methods of histopathological analysis.

Análise morfométrica de micronúcleos e colágeno intersticial em tumores de mama / Morphometric analysis of micronucleuses and interstitial collagen in breast tumors

O presente trabalho estabeleceu a densidade de micronúcleos e a distribuição do colágeno intersticial no tecido tumoral benigno e maligno de mama humana. Foram utilizadas a reação histoquímica de Feulgen e tricrômico de Masson, e a análise digital de imagens. Foram selecionados fragmentos de tecido mamário, diagnosticados como Fibroadenoma (FA), Doença fibrocística (DF) e Carcinoma Ductal Infiltrante (CDI). Para controle, foram utilizadas amostras de plástica mamária com tecido normal. A reação histoquímica foi realizada através da reação de Feulgen, para evidenciação dos micronúcleos, e, para a análise de colágeno intersticial, foi utilizada a coloração tricrômico de Masson. O número médio de micronúcleos exibiu valores semelhantes em amostra de FA (90,8 ± 4,5), DF (80,3 ± 4,0) e tecido normal (83,0 ± 4,1). Entretanto, valores significativamente menores que aqueles foram encontrados no CDI (176,5 ± 88,3). Quanto à distribuição do colágeno intersticial, constatou-se um aumento estatisticamente significante (p< 0,001) nos casos de FA (8101,4 ± 405,07) e DF (7046,78 ± 352,33), quando comparados ao tecido mamário normal (1733,13 ± 86,65) e ao CDI (2165,94 ± 108,29). Pode-se concluir que tanto o método de análise de imagem como a reação de Feulgen mostraram-se eficientes para evidenciar as alterações do núcleo celular e da matriz extracelular de tumores de mama.

Experimental schistosomiasis in the common marmoset Callithrix jacchus.

In order to evaluate Callithrix jacchus as an animal model for mansoni schistosomiasis, a group of 10 male animals were once percutaneously exposed to 250 cercariae of the Schistosoma mansoni SLM (São Lourenço da Mata) strain. Animals were periodically bled for measuring serum level of enzymes and proteins and for blood cell counting. When comparing pre-infection to post-infection values, a significant increase was found for alkaline phosphatase at 15 to 120 days p.i., differential counts of eosinophil at 45 and 60 days, and total protein and global eosinophil counts at 120 days. No Schistosoma mansoni eggs were found in stools. Adult worms of small size were recovered from five animals. At day 120, the number of Schistosoma mansoni eggs/g of tissue was 0-289.7 (liver), 0-30.1 (large intestine) and 0-171.4 (small intestine). These findings lead us to classify Callithrix jacchus as a non-permissive host to the SLM strain of Schistosoma mansoni.

Experimental schistosomiasis in the Common Marmoset Callithrix jacchus

Com o objetivo de avaliar o Callithrix jacchus (sagüi) como modelo experimental para a esquistossomose, um grupo de 10 animais, machos, adultos jovens, foram expostos a 250 cercárias da cepa SLM (São Lourenço da Mata) do Schistosoma mansoni, pela via percutânea. A intervalos de 15 dias até 120 dias apos infecção foram dosados os níveis de proteínas totais e enzimas séricas, além de realizados exames parasitológico e hematológico. Aumento significativo foi observado para: fosfatase alcalina a partir do 150 dia; contagem global de eosinófilos aos 120 dias, e diferencial de eosinófilos aos 45 e 60 dias p.i. Nao se observou ovos de Schistosoma nas fezes. A perfusão cinco animais apresentaram vermes adultos. Todos os vermes encontrados eram diminutos. O número de ovos foi 0-289,7 ovos/g de tecido no fígado, 0-30,1 no intestino grosso, 0-171,4 no intestino delgado. Esta observaçoes levam-nos a concluir que o Callithrix jacchus seja não-permissivo ao Schistosoma.

Complete acute occlusion of the portal vein in dogs: II. A study of acid-base balance aimed at its application in liver transplantation

Como etapa inicial de um plano geral de pesquisa sobre avaliacao de derivacoes portossistemicas descompressivas, habitualmente usadas em transplante hepatico ortotopico experimental, os autores estudaram 20 caes mesticos, adultos, de ambos os sexos e com peso corporal de 15,2 ñ 1,7 kg. Em dez animais procedeu-se a oclusao total e aguda da veia porta durante 2 h (Grupo Oclusao Portal). Nos dez animais restantes, praticou-se a operacao simulada (Grupo Controle). Foram investigados, de modo sistematico, dados do equilibrio acido-basico no sangue arterial e no sangue portal desses animais. Tais dados foram analisados estatisticamente, permitindo concluir com um limite de probabilidade de erro de 5 por cento que a oclusao total e aguda da veia porta praticada em caes, nas condicoes de experimentacao usadas no presente estudo, produziu nos referidos animais: 1. Acidose metabolica no sangue arterial, caracterizada por aumento da concentracao do ion ('cH POT. +') e diminuicoes da pressao parcial de gas carbonico ('pCO IND. 2') e da concentracao de bases totais (cBT); 2. Acidose mista no sangue portal, evidenciada por elevacao da concentracao do ion hidrogenio ('cH POT. +'), da pressao parcial de gas carbonico ('pCO IND. 2') e de diminuicao da concentracao de bases totais (cBT), assim como por hipoxemia...